RiboEx TM es un kit completo con reactivos listos para usar para el aislamiento de ARN total de muestras de origen humano, animal, vegetal, levadura, bacteriana y viral. RiboEx TM se basa en la disrupción de las células en solución de sal de guanidina / detergente, seguida por la extracción orgánica y la precipitación con alcohol del ARN, y permite el procesamiento simultáneo de un gran número de muestras. RiboEx TM puede producir hasta 10 ㎍ / 1 mg de tejido o hasta a 30 ㎍ / 1 x 106 células cultivadas de ARN total altamente purificado. El ARN total resultante es adecuado para el aislamiento de ARN poli A +, transferencia Northern, transferencia de puntos, traducción in vitro, clonación, RT-PCR, ensayos de protección de RNasa y otros procedimientos analíticos.
El kit RibospinTM Plant está especialmente diseñada para la purificación de ARN total de diversos tejidos vegetales, tales como hojas, tallos, raíces y muestras de plantas quisquillosas. Este kit proporciona la columna optimizada de amortiguación y giro, que es eficaz en la eliminación de polisacáridos y compuestos polifenólicos y el aislamiento intacto de ARN de la planta. Todos los componentes de la planta Ribospin TM están listos para su uso, por lo que no se requiere ninguna preparación adicional para el experimento.
El procedimiento de la Planta Ribospin TM comienza con la interrupción de la muestra en nitrógeno líquido utilizando mortero y mano de mortero. La muestra interrumpida puede lisarse en tampón RPL o REL. En la mayoría de los casos, el tampón RPL es el mejor tampón para la lisis. Sin embargo, en algunas muestras de plantas, la solidificación del lisado puede ocurrir con el tampón RPL debido al endospermo de la semilla o metabolitos peculiares y esto se puede evitar usando el tampón REL como alternativa para el tampón RPL. La mayoría de las impurezas excepto el ARN en el lisado se eliminan por filtración a través del filtro EzPure TM y luego el lisado pasante se mezcla con etanol para ajustar la condición de unión.
El ARN total que incluye una pequeña impureza está unido a la membrana de la columna de espín tipo W mientras la mezcla está pasando. El ADN genómico sobrevivido puede ser exterminado por el tratamiento con DNasa I de la columna en este paso. Después de una serie de etapas de lavado
Utilizando el tampón RBW y RNW, el ARN total de la planta se eluye con agua libre de RNasa. El procedimiento completo de la planta Ribospin TM tarda sólo 25 minutos. El ARN purificado es adecuado para la síntesis de cDNA, RT-PCR, transferencia Northern y otros procedimientos analíticos.